Baltymų afininė chromatografina naudojant imobilizuotus metalo jonus

Atlikti kiaušinio lizocimo (eksponuota His-15 liekana) ir arklio širdies mioglobino (eksponuotos His-113 ir His-116 liekanos) mišinio frakcionavimą ant sorbento Sefarozė-IDA, įkrauto Cu II jonais.
Kolonėlė, gradientatorius, pH-metras, chromatografinė aparatūra, automatinės pipetės, spektrofotometras.
1. Sorbento Sefarozė-iminodiacto rūgštis paruošimas ir pakrovimas Cu2+ jonais.
2. Buferinių tirpalų ruošimas. Buferis 1: 10 mM Tris-HCl, pH 7,0, turintis 0,2 M natrio sulfato; buferis 2: 10 mM NaTris-HCl, pH 7,0, turintis 0,2 M natrio sulfato ir 100 mM imidazolo (0,17 g druskos tirpinama 25 ml buferio), pH sureguliuojamas iki 7,0.
3. Baltymų mišinio ruošimas. Iš dėstytojo gauta 11 ml mioglobino ir lizocimo tirpalo 1 buferyje. Matuojama bendra baltymo koncentracija mišinyje.
Darbo eiga
Baltymų mišinio pavyzdys įvedamas į kolonėlę 40 ml/h greičiu persitaltiniu siurbliu ir sorbentas plaunamas buferiniu tirpalu 1 renkant eliuato frakcijas kas 5 min. Sorbuoto baltymų mišinio dalis desorbuojama linijiniu...

Daugiau informacijos...

★ Klientai rekomenduoja

Šį rašto darbą rekomenduoja mūsų klientai. Ką tai reiškia?

Mūsų svetainėje pateikiama dešimtys tūkstančių skirtingų rašto darbų, kuriuos įkėlė daugybė moksleivių ir studentų su skirtingais gabumais. Būtent šis rašto darbas yra patikrintas specialistų ir rekomenduojamas kitų klientų, kurie po atsisiuntimo įvertino šį mokslo darbą teigiamai. Todėl galite būti tikri, kad šis pasirinkimas geriausias!