Baltymų afininė chromatografija naudojant imobilizuotus metalo jonus

Atlikti kiaušinio lizocimo (eksponuota His-15 liekana) ir arklio širdies mioglobino (eksponuotos His-113 ir His-116 liekanos) mišinio frakcionavimą ant sorbento Sefarozė-IDA, įkrauto Cu (II) jonais.
Kolonėlė (10/100 mm),spektofotometras, pH-metras, grandientatorius,pipėtės, automatinės pipėtės, chromatografinė aparatūra.
1. Sorbento Sefarozė-iminodiacto rūgštis paruošimas ir pakrovimas Cu2+ jonais.
2. Buferinių tirpalų ruošimas. Buferis 1: 10 mM Tris-HCl, pH 7,0, turintis 0,2 M natrio sulfato; Buferis 2: 10 mM NaTris-HCl, pH 7,0, turintis 0,2 M natrio sulfato ir 100 mM imidazolo (0,17 g imidazolo tirpinama 25 ml buferio 1), pH sureguliuojamas iki 7,0.
3. Baltymų mišinio ruošimas. Iš dėstytojo gauta 10,5 ml lizocimo ir mioglobino tirpalo 1 buferyje. Matuojama bendra baltymo koncentracija mišinyje.
Baltymų mišinio pavyzdys (10,5 ml) įvedamas į kolonėlę 40 ml/h greičiu su peristaltiniu siurbliu. Sorbentas plaunamas buferiniu tirpalu 1 (10 tūrių/sorbento tūriui), renkant eliuato frakcijas kas 5 min....

Daugiau informacijos...

★ Klientai rekomenduoja

Šį rašto darbą rekomenduoja mūsų klientai. Ką tai reiškia?

Mūsų svetainėje pateikiama dešimtys tūkstančių skirtingų rašto darbų, kuriuos įkėlė daugybė moksleivių ir studentų su skirtingais gabumais. Būtent šis rašto darbas yra patikrintas specialistų ir rekomenduojamas kitų klientų, kurie po atsisiuntimo įvertino šį mokslo darbą teigiamai. Todėl galite būti tikri, kad šis pasirinkimas geriausias!