Referatai

Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė

10   (1 atsiliepimai)
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 1 puslapis
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 2 puslapis
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 3 puslapis
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 4 puslapis
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 5 puslapis
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 6 puslapis
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 7 puslapis
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 8 puslapis
Žmonių juodligė (anthrax). Laboratorinė diagnozė 9 puslapis
www.nemoku.lt
www.nemoku.lt
Aukščiau pateiktos peržiūros nuotraukos yra sumažintos kokybės. Norėdami matyti visą darbą, spustelkite peržiūrėti darbą.
Ištrauka

 Referatas ŽMONIŲ JUODLIGĖS (ANTHRAX) LABORATORINĖ DIAGNOZĖ Turinys Laboratorinė diagnozė: • Sutrumpinimai.................................................................3psl • Mėginiai...........................................................................4psl • Tiesioginė mikroskopija..................................................4psl ▪ Dažymas Gramo būdu..........................................4psl ▪ Dažymas polichromo metileno mėlyojo dažais....4psl ▪ Dažymas Gimzos dažais.......................................5psl ▪ Dažymas Leishman‘o dažais................................5psl • Bakteriologinis tyrimas....................................................6psl ▪ Išskyrimas.............................................................6psl ▪ Identifikacija.........................................................6psl ◦ KA......................................................................6psl ◦ MPS....................................................................6psl ◦ MPA...................................................................6psl ◦ MPŽ....................................................................7psl ◦ PLET...................................................................7psl ◦ Polimiksino KA..................................................7psl ◦ Bikarbonato agaras.............................................7psl ▪ Ypatingi B.anthracis bruožai.................................7psl • Jautrumas penicilinui5................................7psl • Jautrumas gamma bakteriofagui................7psl • Imunologinis tyrimas........................................................7psl ▪ ELISA metodas.................................................7psl ▪ Termoprecipitacijos Askoli r-cija......................8psl ▪ Precipitacijos as agiutinacijos r-cija..................8psl ▪ Imunofluorescencija..........................................8psl • Serologinis tyrimas...........................................................8psl ▪ Odos alerginis mėginys.....................................8psl • Nauji molekilinės diagnostikos metodai...........................8psl ▪ PGR...................................................................8psl • Panaudota literatūra..........................................................9psl Sutrumpinimai: B. anthracis – bacillus anthracis; B. cereus – bacillus cereus; PLET - polimiksino-lizocimo EDTA-talio acetato agaras; MPA – mėsos peptono agaras; MPS – mėsos peptono sultinys; KA – kraujo agaras; MPŽ – mėsos peptono želė; Mėginiai Žmonių juodligės diagnozei patvirtinti būtinas bakteriologinis tyrimas. Medžiaga tyrimui imama iš pūslelių, tiriami skrepliai, išmatos (priklausomai nuo ligos formos), kraujas, pažeistos odos ar kvėpavimo takų sekretas ar tam tikras kiekis specifinių antikūnių iš paciento įtartino kraujo. Karščiuojantiems ligoniams tiriama hemokultūra, sėjant kraują į mėsos-peptono buljoną. Pasėlį, palaikytą 3 valandas termostate, galima tirti imunofluorescencinės mikroskopijos būdu. Tiesioginė mikroskopija B. anthracis gamina kapsules in vivo. Jų dažymui naudojamas Gimzos, Kleto, Olto, ir kiti metodai, polichromo metileno mėlynasis. Pirmiausiai mikroskopu tiriami Gramo būdu dažyti preparatai. Matyti stambios, stačiai nupjautais galais, gramteigiamos lazdelės. Kita medžiagos dalis siunčiama į ypač pavojingų infekcijų laboratoriją. Diagnostinės reikšmės turi kapsulės suradimas patologinėje medžiagoje. Dažant polichromo metileno mėlynuoju, matomos trumpos lazdelių grandinėlės, apsupusios rožines kapsules (M'Fadyeano reakcija). Dažant Gimzos metodu, kapsulė matoma raudonai-violetinės spalvos. Dažymas Gramo būdu Gramo būdu dažytuose tepinėliuose, darytuose iš klinikinės medžiagos, žiūrint mikroskopu, matomos Gram teigiamos plonos, tiesios ilgos (3-10μm) ir (1-1,5 μm) skersmens bacilos su nupjautais galais ir išsidėsčiusios lygiagrčiai viena kitai arba susijungusios po tris keturias ir daugiau sudarydamos grandinėlę. Bacilų grandinėlė nukirstais galais yra panaši į “bambuko lazdelę”. Šiama paveiksle šalia bacilų dar matomi išsidėstę polimorfiškų leukocitų branduoliai. • Daryti pagal pavyzdinį metodą; • Laikytis tipiškos bacilų morfologijos; • Prisiminti, kad Gramo dažai nenaudojami, norint pamatyti bacilos kapsulę; Dažymas polichromo metileno mėlynojo dažais Kapsulių stebėjimui naudojami polichromo metileno mėlynojo dažai (M’Fadyean reakcija); tai idealus metodas pamatyti bacilų kapsules. • Ant tepinėlio užlašinti didelį lašą polichromo metileno mėlynojo dažų ir uždengti kitu stikleliu. • Palikti 30-60 sekundžių, po to išdžiovinti ore. • Nuplauti (hipochlorito tirpale, 10,000 ppm) geriau su vandens buteliu negu čiaupu. • Tepinėlis tirti užlašinus aliejaus imersijos. Kapsulė yra aiškiai matoma kaip rožinė amorfiška medžiaga aplink mėlynai juodą bacilą. Leishman ir Gimzos dažai rekomenduojami CSF dažymui, kitų kūno skysčiai ir kraujas yra aiškiai matomi ląstelių fone. Polichromo metileno mėlynojo dažais nudažytame tepinėlyje, žiūrint per mikroskopą, matomos mėlynos bacilos, kapsulė apsupanti bacilą, yra raudona. Dažymas Gimzos dažais Šie dažai ypač naudojami kraujo tepinėlių dažymui. • Paruošiami švieži Gimzos dažai, atskiesti distiliuotu vandeniu santykiu 1:10 (pH 7,2). • Ant tepinėlių užlašinti dažų. • Fiksuoti metanoliu 1 minutę. • Plauti su vandens buteliu hipochlorito tirpale. • Užpilti Gimzos dažų. • Dažyti 25-30 minučių. • Su vandeniu atsargiai nuplauti dažus ir apsaugoti nuosėdų likutį ant juostelės • Džiovinti mikroskopinį stiklelį laikant vertikaliai. • Tirti su aliejaus imersija. Bacilos nusidažo rožine spalva, o kapsulė – raudonai. Dažymas Leishman’o dažais • Užpilti 8-12 lašų Leishman’o dažų ant tepinėlio. • Palaukti 2 minutes. • Praskiesti dvigubu kiekiu buferinio vandens. • Sumaišyti su Pastero pipete. • Palaikyti 7-10 minučių. • Nuplauti dažus. • Nusausinti ir išdžiovinti ore, Džiovinant laikyti mikroskopinį stiklelį vertikaliai. • Tirti ant tepinėlio užpylus aliejaus imersijos. Bacilos nusidažo rožine spalva, tarp bacilų ir kapsulių matomas skaidrus tarpas. Bakteriologinis tyrimas Išskyrimas B. anthracis nėra išrankus organizmas ir gali augti ant paprastų maitinamųjų terpių. Jie yra fakultatyvūs anaerobai. Optimali augimo temperatūra +37C, pH 7.0 – 7.4. B.anthracis išskyrimui naudojama Knyslei (1966) aprašyta selektyvinė terpė - polimiksino-lizoeimo EDTA-talio (PLET) acetato agaras. Bacilos taip pat gali būti auginamos ir stebimos iš pilvo vandenės skysčio, krūtinplėvės eksudato ir cerebrospinalinio skysčio (meningito atveju), skysčio atsargiai gautu iš šašų, nors šašų skysčio išspaudimas nėra rekomenduojamas, nes galima paskleisti ligos sukėlėjus. 3.Pav. B. anthracis vegetatyvinių ląstelių ir sporų fotomikrografija Paveikslas A rodo tepinėlyje Gramo būdu nudažytas B. anthracis bakterijas. Bakterijų ląstelės yra Gram teigiamos (violetinės lazdelės). Vaizdas padidintas 600 kartų). Paveikslas B rodo B. anthracis sporų (strėliagalvių), dalinai apsuptų pseudopodijomis, išaugintų iš mikrofagų, fotomikrografiją (padidinta 137,000 kartų). Stulpelis reiškia vieną mikrometrą. Identifikacija Avies kraujo agare (KA) B. anthracis silpna hemolizė gali būti stebima labai retai toje vietoje, kur susiliejusios kolonijos, tačiau ji neturėtų būt supainiojama su beta hemolize. KA išauga B. Anthracis pilkos spalvos kolonijos. Mėsos peptono sultinys (MPS) po 24 val. augimo yra skaidrus, dugne susidaro nuosėdos, panašios į vatos gabalėlius. Mėgintuvėlį pakračius, nuosėdos suyra, pakyla į viršų ir matomos blizgančių baltų grūdelių pavidalu. Plėvelė sultinio paviršiuje nesusidaro. Mėsos peptono agare (MPA) po 48 val. išauga apie 5 mm, pilkšvai baltos, iškeltos, matinės, nelygiu paviršiumi ir nelygiais kraštais (R formai), panašios į snaiges ar kometas, bacilų kolonijos. Žiūrint pro mikroskopą mažuoju padidinimu, kolonijų kraštai atrodo lyg susiraizgę siūlai ar garbanos; kolonijos panašios į "medūzos galvą". B. mycoides kolonijos primena grybelio kolonijas. Tai matoma pasėjus ant MPA (sėjama centre). Kultivuojama kelias dienas, esant +25-30 "C temperatūrai. Daugelis kamienų sukelia silpną hemolizę. Mėsos peptono želė (MPŽ). pasėjus dūrio metodu, matomas pilkšvai baltas strypas, nuo kurio tiesiu kampu eina šoninės ataugėlės. Viršutinėje stulpelio dalyje jos ilgesnės, o į apačią trumpėja. Augimas panašus į apverstą eglutę PLET agaras yra naudojama atskirti B.anthracis nuo užkrėstų klinikinių medžiagų. Terpė susideda iš širdies mišinio agaro su polimiksino – lizocimo EDTA – talio (PLET) acetatu. Po 36-48 val. augimo 37C, kolonijos yra 1-3 mm, šiurkščiai apskritos formos( R forma), balkšvos spalvos su matiniu paviršiumi. Kolonijos dažniausiai būna mažesnės lyginant su KA ar maitinamąja terpe. Polimiksino kraujo agaras dažniausiai yra naudojamas suspensijos tyrimams iš irstančių ar pakitusių gyvūnų mėginių ar aplinkos mėginių tam, kad silpninti ar užkirsti kelią Gram neigiamų bakterijų augimui. Bikarbonato agare kolonijos yra gleivėtos priklausomai nuo kapsulės struktūros. Pusiau skystoje terpėje sukėlėjai dažniausiai nejudrūs, sacharidų nefermentuoja, suleidus virulentiškų padermių į pilvo ertmę laboratorinės pelės ar jūrų kiaulytės žūva. Ypatingi B. anthracis bruožai Jautrumas penicilinui G5 B. anthracis beveik visada jautri penicilinui, tai rodo jautrumas penicilino G10 diskams ant Miulerio agaro. Tačiau nepatogeniškos Bacillus rūšys yra paprastai atsparios penicilinui. Jautrumas gama bakteriofagui Gama fagai gali lizuoti B. anthracis augimą ant kraujo ar kitų maitinamųjų terpių. Retai lizuoja kitas Bacillus rūšis Imunologiniai tyrimai ELISA metodas. Dauguma B. anthracis imunogeninių proteinų yra kapsuliniai antigenai ir egzotoksino komponentai. Specifiniai su fermentais susiję imunosorbento tyrimai (ELISA) yra naudojami po infekcijos arba skiepijimo. Labiausiai patikimi indikatoriai yra apsauginių antigenų antikūnių ir kapsulinių komponentų antikūnių titrai. Antikūnių titrų, matavimo studijose, naudojant ELISA metodą, galimų indikatorių jautrumas buvo toks: 72% - apsauginiam antigenui, 95-100% - kapsuliniam antigenui, 42% - letaliam (mirtinam) faktoriui ir 26% edemos faktoriui. Netiesioginė mikrohemagliutinacija, duoda panašius į ELISA metodo rezultatus tačiau turi aiškius trūkumus, tokius kaip ribotas testų kiekis ir ilgesnis paruošimo laikas. Bendros infekcijos atveju kraujo egzotoksinų imunologinis aptikimas įmanomas panašių testų pagalba, jei yra juodligės toksinams antikūnių, bet šie testai yra nepatikimi diagnozuoti juodligei. Nors šie testai turi epidemiologinę reikšmę, tačiau ūmios ligos diagnozei turi mažai reikšmės. Bendros infekcijos atveju toksinų ir kapsulinių komponentų antikūniai negali būti aptikti iki vėlyvosios ligos stadijos, kai dažniausiai pradėti gydymą jau būna per vėlu. Termoprecipitacijos Askoli reakcija. Atliekama ieškant sukėlėjų polisacharidinių antigenų, esančių užkrėstoje medžiagoje: vilnoje, kailiuose. Ši reakcija taip pat padeda nustatyti mirties priežąstį. Iš tiriamos medžiagos gabalėlių gaminamas termoekstraktas ir maišomas su juodligės sukėlėją precipituojančiu serumu. Precipitacijos ar agliutinacijos reakcija. Nustatomi antikūniai kraujo serume. Rodo ligą arba vakcinaciją. Šios reakcijos nėra labia specifiškos. Imunofluorescencija – tai greitas diagnostikos metodas, padedantis nustatyti juodligės sukėlėjo antigenus. Paruošta tiriamoji medžiaga veikiama kapsuliniu juodligės antiserumu, o po to fluorescuojančiu antiserumu. Mikropreparatuose, kuriuose yra kapsulių, stebima bacilų fluorescencija. Serologiniai tyrimai Odos alerginis mėginys. Gydant infekcijas, nėra matomas antitoksinų antikūnių pagausėjimas. Ūmios ir išankstinės juodligės diagnozei taikomas juodligės odos testas, susidedantis iš susilpnintos padermės B. anthracis komerciškai gaminamo cheminio ekstrakto poodinės injekcijos. Į paodį suleidžiama 0,1 ml antraksino. Esant teigiamai reakcijai, suleidimo vietoje atsiranda paraudimas ir infiltratas (riboto audinių ploto sutandėjimas ir patinimas) Vienų tyrimų duomenimis odos testas aptiko 82% atvejų ir 1-3 dienų po simptomų protrūkio ir 99% atvejų ketvirtos savaitės pabaigoje. Odos testas yratinkamas abiem atvejais: skubios diagnozės ūmiais atvejais ir retrospektyvinei juodligės infekcijų analizei. Nauji molekulinės diagnostikos metodai Naujos diagnostikos technologijos naudoja polimerazės grandinės reakciją (PGR) stiprinti B. anthracis ir B. cereus būdingus grupės požymius. Du požymiai Avrr ir Ba813 buvo intensyvių studijų objektas. Kiti metodai , naudojantys polimerazės grandinės reakciją sustiprinti skirtingų juodligės padermių bruožus, taip pat greitai bus prieinami. Šie nauji metodai bus naudingi klinikiniuose tyrimuose, kur ankstyva diagnozė yra lemiama. Panaudota literatūra 1) Prieiga per interneta:

Daugiau informacijos...

Šį darbą sudaro 1456 žodžiai, tikrai rasi tai, ko ieškai!

★ Klientai rekomenduoja


Šį rašto darbą rekomenduoja mūsų klientai. Ką tai reiškia?

Mūsų svetainėje pateikiama dešimtys tūkstančių skirtingų rašto darbų, kuriuos įkėlė daugybė moksleivių ir studentų su skirtingais gabumais. Būtent šis rašto darbas yra patikrintas specialistų ir rekomenduojamas kitų klientų, kurie po atsisiuntimo įvertino šį mokslo darbą teigiamai. Todėl galite būti tikri, kad šis pasirinkimas geriausias!

Detali informacija
Darbo tipas
Lygis
Universitetinis
Failo tipas
Word failas (.doc)
Apimtis
9 psl., (1456 ž.)
Darbo duomenys
  • Ligų ir traumų referatas
  • 9 psl., (1456 ž.)
  • Word failas 1007 KB
  • Lygis: Universitetinis
www.nemoku.lt Atsisiųsti šį referatą
Privalumai
Pakeitimo garantija Darbo pakeitimo garantija

Atsisiuntei rašto darbą ir neradai jame reikalingos informacijos? Pakeisime jį kitu nemokamai.

Sutaupyk 25% pirkdamas daugiau Gauk 25% nuolaidą

Pirkdamas daugiau nei vieną darbą, nuo sekančių darbų gausi 25% nuolaidą.

Greitas aptarnavimas Greitas aptarnavimas

Išsirink norimus rašto darbus ir gauk juos akimirksniu po sėkmingo apmokėjimo!

Atsiliepimai
www.nemoku.lt
Dainius Studentas
Naudojuosi nuo pirmo kurso ir visad randu tai, ko reikia. O ypač smagu, kad įdėjęs darbą gaunu bet kurį nemokamai. Geras puslapis.
www.nemoku.lt
Aurimas Studentas
Puiki svetainė, refleksija pilnai pateisino visus lūkesčius.
www.nemoku.lt
Greta Moksleivė
Pirkau rašto darbą, viskas gerai.
www.nemoku.lt
Skaistė Studentė
Užmačiau šią svetainę kursiokės kompiuteryje. :D Ką galiu pasakyti, iš kitur ir nebesisiunčiu, kai čia yra viskas ko reikia.
Palaukite! Šį darbą galite atsisiųsti visiškai NEMOKAMAI! Įkelkite bet kokį savo turimą mokslo darbą ir už kiekvieną įkeltą darbą būsite apdovanoti - gausite dovanų kodus, skirtus nemokamai parsisiųsti jums reikalingus rašto darbus.
Vilkti dokumentus čia:

.doc, .docx, .pdf, .ppt, .pptx, .odt